2013年,祝绪丹在中央电视台普法栏目剧《卧底前传之姐妹篇》中首次亮相,饰演了乡村女孩小美一角,从而正式开始自己的演艺生涯;10月,她在网络喜剧《屌丝男士3》中客串内衣店女店员;12月,主演古装音乐微电影《龙潭梦》,并饰演穿越千年的画中人。2014年4月起,与周铁男等合作主演了“咖啡短剧”系列剧情微电影,其中《晚安陌生人》、《爱神之夜》获第二届亚洲微电影艺术节“金海棠”奖;随后,她还参演了惊悚网络剧《灵魂摆渡2》,饰演少女小鱼;12月,参与拍摄都市情感网络剧《心碎急诊室》,饰演李欣瑶;同年12月起,拍摄古装战争电视剧《英雄诀》,饰演章犀犀;同年,她还参加了湖南娱乐频道主办的星姐选举并获得亚军。2016年1月8日,祝绪丹作为单元剧女主角出演了民国悬疑电视剧《煮妇神探》,并在“月份牌案件”中饰演了善良单纯、极具正义感的月份牌女郎秋水;2月21日,与刘恺威、郑爽合作出演的清装宫廷爱情剧《寂寞空庭春欲晚》播出,祝绪丹在剧中饰演俏皮可爱的端敏公主。2017年1月30日,与杨幂、赵又廷合作主演的古装玄幻剧《三生三世十里桃花》首播,她在剧中饰演了白浅的表亲玄女,该剧则以双台平均破一的成绩取得了全国同时段电视剧收视冠军,其全网播放量在播出期间便接近了300亿次,祝绪丹个人也因此得到了更多观众的认可;4月12日,她领衔主演的改编自九夜茴青春三部曲之一的《初恋爱》开机拍摄,祝绪丹在剧中饰演美丽、善良、执着的温静;4月18日,其主演的青春偶像剧《囧女翻身之嗨如花》在优酷视频播出,她在剧中饰演自带笑点、萌点、爆点的“奇葩推销员”鲁如花;随后,祝绪丹还主演了玄幻悬疑网剧《画心师》,并在剧中饰演了外冷内热的画心师岑欢。2018年2月,祝绪丹出演的都市时尚剧《谈判官》在湖南卫视黄金档播出,她在剧中饰演职场小白兔商碧晨;6月25日,与迪丽热巴、邓伦主演都市爱情剧《一千零一夜》首播,她在剧中饰演了优雅迷人的花艺师周心妍;随后,她还搭档阮经天、王天辰等主演年代传奇情感剧《一身孤注掷温柔》,并在剧中饰演顾婉凝。2019年1月17日,祝绪丹与侯明昊主演的悬疑探案剧《心宅猎人》开机拍摄,她在剧中饰演了有着双重人格、天真而又傲娇的大小姐元慕青;2月27日,与曾舜晞、陈钰琪领衔主演的古装武侠剧《倚天屠龙记》在腾讯视频播出,起在剧中饰演美丽灵秀、淡雅脱俗,却因爱生恨的峨眉派第四代掌门人周芷若。10月10日,加盟国内首档导演选角真人秀《演员请就位》;10月12日,参加青春体娱跨界类型节目《超新星全运会第二季》。